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产品名称:细胞毒性T淋巴细胞株 CTLL-2

产品型号:QB-004

产品报价:

产品特点:细胞描述: 该细胞是源自C57BL/6的细胞毒性的T淋巴细胞,生长依赖IL-2。细胞毒性T淋巴细胞株 CTLL-2增殖能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖能力,方便您的后继研究顺利进行。

QB-004细胞毒性T淋巴细胞株 CTLL-2的详细资料:

细胞毒性T淋巴细胞株 CTLL-2

细胞描述:   
该细胞是源自C57BL/6的细胞毒性的T淋巴细胞,生长依赖IL-2

细胞毒性T淋巴细胞株 CTLL-2增殖能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖能力,方便您的后继研究顺利进行。    

货号

规格

培养基

运输

保存

QB-004

3×106/

RPMI1640 10%FBS

干冰运输

液氮保存

质量控制:   
本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIVHBVHCV)、支原体。 

培养条件
37℃,5% CO2,pH7.2~7.4,无菌恒温培养。

生长特性

悬浮生长 
用途:   
本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。

细胞相关操作:

细胞复苏

1. 37°C水浴预热培养基
2。从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞)
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4。弃上清,加入5ml培养基重悬细胞,用血小球计数板进行细胞计数,按细胞密度4-5×105/ml接种到25ml细胞培养瓶中
5.置于37°C,5% CO2的培养箱中静置培养

细胞传代

1。取细胞计数(详见细胞冻存),当细胞密度达到1.0-3.0×106/ml时(zui好不要超过3。0×106cells/ml),可传代

2.37°C水浴预热培养基

3。在超净台中,加适量预热好的培养基到无菌摇瓶中,以细胞终密度为4-5×105/ml接种细胞(也可1000rpm,5min离心后弃上清,用预热好的培养基重悬并调整细胞密度为5.0×105/ml),25ml细胞培养瓶中
4.置于37°C,5% CO2的培养箱中静置培养。

细胞冻存

1.细胞计数:

1)洗净晾干血小板计数板和盖玻片,将盖玻片完全覆盖计数区;

2)充分混匀细胞,取少量(0。1-0。5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合,移液器吹吸混合均匀,用移液器取20ul混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞,以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳;

3)显微镜下,数四个计数区的总细胞数,无活性细胞染成蓝色,活细胞不被染色;

4)细胞密度=细胞总数/4×10000×2

这里10000是不变的,因为计数的细胞是在体积为1mm×1mm×0.1mm10-4cm3计数池内,1cm3=1ml将四个计数区的细胞数除以4取平均数,乘2是补偿加等体积台盼蓝形成的稀释。

5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×100%

注:细胞密度高时,可调整细胞悬液和台盼蓝的比例,计数时乘以相应的稀释倍数即可

2.当细胞密度达到传代密度且细胞活性在90%以上时,可以冻存细胞。

3.37°C水浴预热培养基。

4.在超净台中将要冻存的细胞移入离心管,1000rpm离心5min。

5。弃上清,用90%培养液 10%DMSO的混合液重悬细胞,并调整细胞密度为4-6×106/ml。

6.将细胞悬液分装到冻存管中(1-1.5ml/管)。

7.将装有细胞的冻存管放入程序降温冻存盒,-20°C1-2h后,-80°C过YE,然后快速转移到液氮中

收到复苏好的细胞的处理方法:
1。 先从外包装盒拿出离心管,在离心管表面喷一层酒精,并小心去掉封口膜;

2. 将离心管中的细胞在超净工作台内取出一部分进行细胞计数(详见细胞冻存)。

3. 如细胞密度小于3×106/ml,可直接将离心管中的细胞转移到T25瓶中,置于37°C,5% CO2的培养箱中静置培养。
4. 如细胞密度超过3×106/ml,操作步骤参照(细胞传代)

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