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酶联免疫试剂盒是一种既特异又敏感的检测方法
点击次数:55 发布时间:2019-07-21
 
酶联免疫试剂盒是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA(酶联免疫吸附试验)法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
尽管早期的酶联免疫试剂盒由于特异性不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着方法的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程方法制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)试验,都大大提高了ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)的特异性,加之电脑化程度极高的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)检测仪的使用,使ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)更为简便实用和标准化,从而使其成为最广泛应用的检测方法之一。
目前酶联免疫试剂盒方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面,ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。
ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使酶联免疫试剂盒方法成为一种既特异又敏感的检测方法。
  
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